混合リンパ球反応（MLR）アッセイ

混合リンパ球反応（MLR）アッセイの背景

混合リンパ球反応（MLR）の原理は、あるドナー由来のT細胞が、別のドナー由来の抗原提示細胞（APC）の存在下で増殖するというものである。これは、血縁関係のない2人のドナー間のHLA不一致が認識されることによって引き起こされ、T細胞からの免疫応答を誘発する。MLRは、培養中のT細胞に対して広範な刺激・活性化を誘導する手段としてよく用いられる。

活性化合物の存在下でMLRを測定することは、その化合物の免疫調節能を評価する上で有用な手法である。MLR反応の利点は、強いベースライン反応（試験化合物を添加しない状態での反応）が得られるため、他の刺激化合物を用いて刺激を与える必要がない点にある。

• 化合物の免疫調節作用をベースラインと比較して評価すること（例：免疫活性化または免疫抑制）
• 患者と健常ドナーとの比較

MLR反応は、異なるドナー由来のPBMC、あるいは同一ドナー由来の単球由来樹状細胞と別のドナー由来のPBMCを共培養することで誘導することができ、これにより特に活発な同種反応が生じる。

当社の標準的な ProScern® DC-T細胞アッセイと非常によく似たプロトコルに従い、以下のデータは、3組のペアワイズミスマッチドドナー（健康なドナーから採取した凍結保存PBMC由来）におけるベースラインMLR反応の例を示しています。

代表的なフローサイトメトリープロット

図2： アッセイは3回の反復セットで実施された。各セットの値（各点で表されている）は、それぞれ8つの反復ウェルにおける平均値である。すべてのドナーにおいて、MLR反応は、増殖したCD4+ T細胞の60～80％を捕捉する範囲に収まった。